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沒有厭氧培養箱怎么進行厭氧培養?

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樓主
發表于 2025-7-3 13:51:29 | 只看該作者 |倒序瀏覽 |閱讀模式
如果沒有厭氧培養箱,可以采用以下幾種替代方法進行厭氧培養:
一、厭氧罐法
原理:利用鈀催化劑催化氫氣和氧氣反應生成水,配合產氣袋釋放氫氣和二氧化碳。
操作步驟:
將接種后的培養基放入厭氧罐。
加入產氣袋(含硼氫化鈉、碳酸氫鈉等),注入少量水觸發產氣。
密封罐體,37℃培養24-48小時。
優點:操作簡便,成本低,適用于常規厭氧菌(如梭菌屬)。
二、真空置換法
原理:通過抽真空后充入無氧混合氣體(如N?:CO?:H?=85:10:5),重復3-4次置換罐內氣體。
適用場景:實驗室中需快速建立低氧環境的小規模培養。
三、Hungate滾管技術
原理:培養基煮沸除氧后持續通入無氧氣體(N?/CO?),使用預還原的厭氧試管,以注射器分裝并快速密封,通過滾管機旋轉使培養基均勻凝固成薄層。
應用:嚴格厭氧菌(如產甲烷古菌)的分離與純培養。
四、焦性沒食子酸法
原理:焦性沒食子酸在堿性條件下與氧氣反應生成焦性沒食子橙。
操作步驟:
在培養皿蓋內放置焦性沒食子酸粉末和碳酸氫鈉(質量比1:10)。
滴加少量水后迅速密封培養皿,靜置培養。
局限:僅適合短時培養(<24小時),氧氣吸收量有限。
五、硫乙醇酸鹽培養基法
原理:培養基中添加硫乙醇酸鈉(0.05%-0.1%),通過巰基(-SH)維持低氧化還原電位。
特點:適用于兼性厭氧菌(如大腸桿菌)的梯度氧培養,液體培養基中可形成氧濃度梯度。
六、刃天青指示劑法
原理:添加刃天青(Resazurin,0.0001%),通過顏色變化(無色→粉紅)實時監測氧氣殘留。
七、共培養法
原理:將需氧菌(如枯草芽孢桿菌)與目標厭氧菌共培養,利用前者快速消耗氧氣。
應用:模擬自然共生環境,研究微生物互作。
八、厭氧手套箱
原理:預抽真空后充入混合氣體,循環凈化至氧含量<5 ppm。
操作流程:
通過空氣鎖傳遞樣品,箱內完成接種、觀察等操作。
優勢:可長期維持無氧環境,適合嚴格厭氧菌(如擬桿菌屬)的高通量實驗。
九、改良燭缸法
原理:通過燃燒白蠟燭在燭缸系統中產生4-5%的二氧化碳,并瞬間降低密封缸內的氧氣水平。
優點:是一種敏感且成本效益高的替代方法,適用于資源有限的環境。
十、硅膠管替代培養法
原理:使用硅膠管替代傳統方法,更有效地研究土壤甲烷循環。
十一、玻璃瓶密封法
原理:將商業MRS培養基加入玻璃瓶中,通入二氧化碳氣體后密封,用于乳酸菌的分離。
優點:簡單可行,適用于乳酸菌的分離。
這些方法可以根據實驗的具體需求和條件選擇使用,以實現厭氧培養的目的。

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沙發
發表于 2025-10-22 01:47:30 | 只看該作者
漲知識了,感謝分享!
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板凳
發表于 2025-12-1 12:16:58 | 只看該作者
樓上的分析很有道理,讓我對這個問題有了新的認識。
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